Ressonância de Plasmon de Superfície para análise de alto rendimento

RESSONÂNCIA DE PLASMON DE SUPERFÍCIE PARA ANÁLISE DE ALTO RENDIMENTO

Análise SPR de alto rendimento e alto desempenho para caracterização em tempo real, sem rótulos, das interações moleculares

Deteção de alto rendimento e alto desempenho de interações moleculares

A ressonância de plasmão de superfície (SPR) é uma tecnologia de deteção sem rótulos, baseada em ótica, para a monitorização em tempo real das interações de união entre duas ou mais moléculas. O rendimento, a flexibilidade e a sensibilidade da plataforma SPR confere aos investigadores a capacidade de caracterizar interações biomoleculares em qualquer estudo de união. Pode ser estudada uma ampla gama de moléculas, desde iões, fragmentos e pequenas moléculas a proteínas e vírus. A tecnologia SPR oferece dados biofísicos, tais como afinidade, cinética e termodinâmica.

Os biossensores analíticos baseados em SPR são ferramentas poderosas na caracterização de interações moleculares. A combinação de três elementos — o detetor, a superfície do sensor e o sistema de fornecimento de amostras — são fundamentais para o desempenho da experiência.

Instrumentos de Ressonância de Plasmon de Superfície Sierra

• Triceratops SPR #64

A nova plataforma SPR da Bruker, a SPR #64, combina detecção altamente sensível com desempenho microfluídico excepcional: a leitura simultânea de 64 pontos de sensores através da rotação perpendicular da célula de fluxo de 8 canais. Este design inovador permite uma ampla gama de aplicações, desde triagem e cinética até caracterização de epítopos e muito mais.

• Sierra SPR® -32 Pro

Desde a triagem inicial até a caracterização cinética detalhada e as medições termodinâmicas, o Sierra SPR®-32 Pro permite a análise SPR de alto rendimento das interações moleculares.

• Sierra SPR® -24 Pro

Para desempenho e análise SPR líderes do setor em uma ampla gama de aplicações, o SPR-24 Pro oferece alto desempenho, alta confiabilidade e alto escopo operacional.

Deteção ótica em tempo real sem rótulos

As interações de união entre uma molécula na superfície do sensor (ligante) e o(s) seu(s) parceiro(s) de ligação na solução (analito) são monitorizadas em tempo real por SPR. 

A SPR utiliza um tipo de reflexão interna total e causa uma redução na intensidade da luz refletida num ângulo específico do lado do vidro da superfície do sensor.  À medida que as moléculas se unem, o índice de refração próximo da superfície muda, causando uma mudança no ângulo da intensidade mínima refletida. A mudança no ângulo é proporcional à massa do material ligado. A saída típica é um sensorgrama, que monitoriza a mudança no ângulo em função do tempo.

Deteção SPR+

O Sierra SPR-24/32 Pro aplica a detecção de formação de imagem de Ressonância de Plasmon de Superfície designada SPR +. SPR+ permite a formação de imagens de matrizes bidimensionais com um nível de sensibilidade de detecção normalmente restrito a matrizes lineares. A SPR + deriva sua alta sensibilidade combinando a formação de imagens SPR tradicional com luz laser de alta intensidade e leitura óptica de alta velocidade. A intensidade da fonte de luz permite o uso de câmeras de alta velocidade, que por sua vez permitem mais medições de ressonância por leitura. O resultado líquido é menor ruído RMS e maior precisão na medição de pequenas mudanças de resposta.

Os sensores fáceis de utilizar reduzem a variabilidade do ensaio

Os sensores usados ​​nos sistemas Sierra SPR são prismas revestidos de ouro, montados em cartuchos fáceis de manusear. O design torna a instalação simples e elimina variações de ensaio relacionadas ao usuário. A superfície de ouro, que é necessária para a SPR, pode ser revestida com uma monocamada automontada para bloquear a união não específica de proteínas e para facilitar a fixação de moléculas à superfície. A crescente variedade de superfícies químicas de ligação aumenta a utilidade dos biossensores analíticos para uma ampla gama de aplicações.

Novos microfluidos de fluxo contínuo

O fornecimento de amostras à superfície do sensor através de um dispositivo microfluídico de fluxo contínuo produz as medições de união mais precisas. Para o fornecimento de amostras reproduzíveis, o sistema Sierra SPR-24/32 Pro utiliza tecnologia patenteada de Isolamento Hidrodinâmico (HI). O HI é um método para a apresentação de volumes de fluido pequenos, mas altamente discretos, a localizações isoladas numa superfície bidimensional contida dentro de uma célula de fluxo sob fluxo laminar. O direcionamento de fluidos específicos da localização dentro da célula de fluxo é facilitado pela combinação de componentes da focagem hidrodinâmica com evacuação específica da localização. O processo não requer a utilização de barreiras físicas dentro da célula de fluxo ou de válvulas mecânicas para controlar os trajetos do movimento do fluido, permitindo, desta forma, a multiplexagem de alto rendimento ou a construção de matrizes bidimensionais com pontos de deteção individualmente endereçáveis.

Aplicações da Ressonância de Plasmão de Superfície

O Sierra SPR Pro-Series é um biossensor analítico de elevado desempenho e alto rendimento para a caracterização em tempo real, sem rótulos, de interações moleculares através de uma ampla gama de aplicações.

• Investigação da união dependente da condição através do uso de Frame Inject

• Como influenciar a densidade do ligante através da utilização do acoplamento de aminas

• Triagem e caracterização da união de pequenas moléculas a alvos proteicos

• Triagem e caracterização da bioterapêutica

• Abordando Alvos Desafiadores com Triagem Biofísica de Alto Rendimento na Novartis: